本方法é©ç”¨äºŽå«PO43-為0.02~50mg/Lå·¥æ¥å¾ªç’°å†·å»æ°´ä¸ç£·å«é‡çš„測定。
1．0 原ç†
在酸性æ¢ä»¶ä¸‹ï¼Œæ£ç£·é…¸é¹½èˆ‡é‰¬é…¸éŠ¨å應生æˆé»ƒè‰²çš„磷鉬雜多酸，å†ç”¨æŠ—壞血酸還原æˆç£·é‰¬è—，于710nm最大å¸æ”¶æ³¢é•·è™•åˆ†å…‰å…‰åº¦æ³•æ¸¬å®šã€‚
2．0 試劑
2．1 磷酸二氫鉀；
2．2 硫酸：1+1溶液；
2．3 抗壞血酸：20g/L；
稱å–10g抗壞血酸，精確至0.5g，稱å–0.2g乙二胺四乙酸二鈉（C10H14O8N2Na2·2H2O），精確至0.01g，溶于200mLæ°´ä¸ï¼ŒåŠ å…¥8.0mL甲酸，用水稀釋至500mL，混勻，貯å˜äºŽæ£•è‰²ç“¶ä¸ï¼ˆæœ‰æ•ˆæœŸä¸€å€‹æœˆï¼‰ã€‚
2．4 鉬酸銨：26g/L溶液；
稱å–13g鉬酸銨，精確至0.5g，稱å–0.5g酒石酸銻鉀（KsbOC4H4O6·1/2H2O），精確至0.01g，溶于200mLæ°´ä¸ï¼ŒåŠ å…¥230mL硫酸溶液，混勻，冷å»åŽç”¨æ°´ç¨€é‡‹è‡³500mL，混勻，貯å˜äºŽæ£•è‰²ç“¶ä¸ï¼ˆæœ‰æ•ˆæœŸäºŒå€‹æœˆï¼‰ã€‚
2．5 磷標準溶液：1mLå«æœ‰0.5mgPO43-
稱å–0.7165gé 先在100~105℃干燥并已æ’é‡éŽçš„磷酸二氫鉀，精確至0.0002g，溶于約500mLæ°´ä¸ï¼Œå®šé‡è½‰ç§»è‡³1L容é‡ç“¶ä¸ï¼Œç”¨æ°´ç¨€é‡‹è‡³åˆ»åº¦ï¼Œæ–勻。
2．6 磷標準溶液：1mLå«æœ‰0.02mgPO43-
å–20.00mL磷酸標準溶液（2.5）于500mL容é‡ç“¶ä¸ï¼Œç”¨æ°´ç¨€é‡‹è‡³åˆ»åº¦ï¼Œæ–勻。
3．0 儀器
3．1 分光光度計：帶有厚度為1cmçš„å¸æ”¶æ± 。
4．0 分æžæ¥é©Ÿ
4．1 工作曲線的繪制
分別å–0（空白）ã€1.0ã€2.0ã€3.0ã€4.0ã€5.0ã€6.0ã€7.0ã€8.0mL磷標準溶液（2.6）于9個50mL容é‡ç“¶ä¸ï¼Œä¾æ¬¡å‘å„瓶ä¸åŠ 入約25mL水，2.0mL鉬酸銨溶液，3.0mL抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，æ–勻，室溫下放置10分é˜ã€‚在分光光度計710nm處，用1cmå¸æ”¶æ± ，以空白調零測å¸å…‰åº¦ã€‚以測得的å¸å…‰åº¦ç‚ºç¸±å標，相å°æ‡‰çš„PO43-é‡ï¼ˆμg）為橫å標繪制工作曲線。
4．2 試樣的制備
ç¾å ´å–ç´„250mL實驗室樣å“經ä¸é€Ÿæ¿¾ç´™éŽæ¿¾åŽè²¯å˜äºŽ500mL燒æ¯ä¸å³åˆ¶æˆè©¦æ¨£ã€‚
4．3 æ£ç£·é…¸é¹½å«é‡çš„測定
從試樣ä¸å–20.0mL試驗溶液，于50mL容é‡ç“¶ä¸ï¼ŒåŠ å…¥2.0mL鉬酸銨溶液，3.0mL抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，æ–勻，室溫下放置10分é˜ï¼Œåœ¨åˆ†å…‰å…‰åº¦è¨ˆ710nm處，用1cmå¸æ”¶æ± ，以ä¸åŠ 試驗溶液的空白調零測å¸å…‰åº¦ã€‚
5．0 分æžçµæžœçš„計算
以mg/L表示的試樣ä¸æ£ç£·é…¸é¹½ï¼ˆä»¥PO43-計）å«é‡ï¼ˆx1），按下å¼è¨ˆç®—：
å¼ä¸ï¼š m1—從工作曲線上查得的以μg表示的PO43-é‡ï¼›
V1—移å–試驗溶液的體ç©ï¼ŒmL。
所得çµæžœæ‡‰è¡¨ç¤ºè‡³äºŒä½å°æ•¸ã€‚
6．0 å…許差
兩次平行測定çµæžœä¹‹å·®ä¸å¤§äºŽ0.30mg/L，å–ç®—è¡“å¹³å‡å€¼ç‚ºæ¸¬å®šçµæžœã€‚